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JIANGE EXPERIMENTAL EQUIPMENT

專(zhuān)注高品質(zhì)實(shí)驗(yàn)室耗材服務(wù)商

一次性培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、吸頭,離心管,冷凍管

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專(zhuān)注品質(zhì) 用戶(hù)至上

先進(jìn)的技術(shù)、過(guò)硬的質(zhì)量、良好的信譽(yù)

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南通健格實(shí)驗(yàn)器材有限公司


南通健格實(shí)驗(yàn)器材有限公司位于江蘇省南通市,濱江臨海,與國(guó)際大都市上海一江相望,地理優(yōu)越,交通便捷。
本公司主要經(jīng)營(yíng):一次性培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、吸頭,離心管,冷凍管,PCR管,PCR板等常用實(shí)驗(yàn)室耗材。健格實(shí)驗(yàn)有著專(zhuān)業(yè)的生產(chǎn)基地,始終以:“專(zhuān)業(yè)專(zhuān)注、誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)”為理念,實(shí)抓產(chǎn)品質(zhì)量,提升客戶(hù)需求為根本,做到:產(chǎn)品優(yōu),服務(wù)全,價(jià)格好。滿(mǎn)足廣大客戶(hù)的產(chǎn)品需求......

健格實(shí)驗(yàn)器材

ADVANTAGE

我們的優(yōu)勢(shì)


01

經(jīng)驗(yàn)豐富

本公司主要經(jīng)營(yíng):一次性培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板、吸頭,離心管,冷凍管,PCR管,PCR板等常用實(shí)驗(yàn)室耗材。

02

品質(zhì)保證

公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備,雄厚的技術(shù)、過(guò)硬的質(zhì)量、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)得到了客戶(hù)的一致好評(píng)

03

技術(shù)雄厚

健格實(shí)驗(yàn)有著專(zhuān)業(yè)的生產(chǎn)基地,始終以:“專(zhuān)業(yè)專(zhuān)注、誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)”為理念,實(shí)抓產(chǎn)品質(zhì)量,提升客戶(hù)需求為根本

04

服務(wù)保障

為客戶(hù)提供更精細(xì)更貼心的服務(wù),產(chǎn)品優(yōu),服務(wù)全,價(jià)格好。滿(mǎn)足廣大客戶(hù)的產(chǎn)品需求。

NEWS

新聞資訊


2023-08-03

關(guān)于培養(yǎng)皿細(xì)菌培養(yǎng)的條件

我們?cè)谟门囵B(yǎng)皿設(shè)備細(xì)菌培養(yǎng)的時(shí)候,首先由于細(xì)菌無(wú)處不在,因此從制備培養(yǎng)基時(shí)開(kāi)始,整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程必須按無(wú)菌操作要求進(jìn)行,否則外界細(xì)菌污染標(biāo)本,會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果;而培養(yǎng)的致病菌一旦污染環(huán)境,就會(huì)引起交叉感染。?因此培養(yǎng)皿要經(jīng)過(guò)高溫滅菌,并且每一組的培養(yǎng)皿要在相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)高溫處理后可以將培養(yǎng)皿上、培養(yǎng)基內(nèi)混有的細(xì)菌或真菌的孢子等殺死(經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的高溫滅菌的環(huán)境中是不可能有細(xì)菌和真菌存在的),這樣就排除了實(shí)驗(yàn)外其他環(huán)境的污染。?用培養(yǎng)皿設(shè)備培養(yǎng)時(shí)應(yīng)根據(jù)細(xì)菌種類(lèi)和目的等選擇培養(yǎng)方法、培養(yǎng)基,制定培養(yǎng)條件(溫度、pH值、時(shí)間,對(duì)氧的需求與否等)。一般操作步驟為先將標(biāo)本接種于固體培養(yǎng)基上,做分離培養(yǎng)。再進(jìn)一步對(duì)所得單個(gè)菌落進(jìn)行形態(tài)、生化及血清學(xué)反應(yīng)鑒定。培養(yǎng)基常用牛肉湯、蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細(xì)菌所需的特殊物質(zhì)配制成液體、半固體、固體等。一般細(xì)菌可在有氧條件下,37℃中放18~24小時(shí)生長(zhǎng)。厭氧菌則需在無(wú)氧環(huán)境中放2~3天后生長(zhǎng)。個(gè)別細(xì)菌如結(jié)核菌要培養(yǎng)1個(gè)月之久。

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2023-08-03

你的細(xì)菌培養(yǎng)物還在增長(zhǎng)嗎?引物在OD-600進(jìn)行測(cè)量

細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)綜述,讓我們先回顧一下細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)的4個(gè)基本階段:log階段,滯后階段,靜止階段和死亡階段(圖1)。在此期間,細(xì)胞正在適應(yīng)和調(diào)整他們的新環(huán)境。然后,培養(yǎng)進(jìn)入對(duì)數(shù)期,在此期間,細(xì)胞迅速分裂,數(shù)量翻倍(大腸桿菌在對(duì)數(shù)期每20分鐘翻一番)。當(dāng)你在液體培養(yǎng)液中達(dá)到最大的細(xì)胞密度時(shí),細(xì)胞就進(jìn)入了靜止期。在這一階段,細(xì)胞數(shù)量沒(méi)有整體增加——死亡的細(xì)胞被新分裂的細(xì)胞所取代,但活細(xì)胞的總數(shù)保持不變。如果你在研究孢子形成細(xì)菌,這可能是營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞孢子形成的階段,或形成新的孢子。最后,死亡(或下降)階段是由多種因素引起的,包括營(yíng)養(yǎng)或氧氣的缺乏,細(xì)胞代謝引起的介質(zhì)pH值的變化,或有毒細(xì)胞廢物的積累。?使用OD600確定您的文化處于什么階段?最簡(jiǎn)單的方法是測(cè)量OD600,或600納米的光密度,來(lái)測(cè)量一個(gè)培養(yǎng)基在其生長(zhǎng)曲線(xiàn)上的距離。這種波長(zhǎng)是專(zhuān)門(mén)為細(xì)菌OD測(cè)量而選擇的,因?yàn)榕c紫外線(xiàn)波長(zhǎng)不同,600nm對(duì)培養(yǎng)物無(wú)害。這種波長(zhǎng)通常也不會(huì)被像TSB和LB這樣的黃色介質(zhì)吸收。通過(guò)監(jiān)視OD600的增長(zhǎng)速度,您可以確定培養(yǎng)物的滯后、記錄和固定相。?那么如何測(cè)量呢?對(duì)于一個(gè)簡(jiǎn)單的懸浮在液體中的細(xì)胞,你首先需要零或“空白”的分光光度計(jì)與新鮮的,未接種的媒介減去媒介對(duì)測(cè)量的任何吸收貢獻(xiàn)。然后,取您的文化樣本并測(cè)量OD600。這種測(cè)量方法可以很容易地計(jì)算出培養(yǎng)瓶中每毫升培養(yǎng)細(xì)胞的總數(shù)。還不錯(cuò)吧?盡管如此,還是有一些事情需要注意:?當(dāng)你提取一個(gè)培養(yǎng)基樣本時(shí),確保你混合的很好,并立即進(jìn)行測(cè)量,因?yàn)榧?xì)胞可以在一分鐘左右的時(shí)間內(nèi)開(kāi)始沉淀,這將導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。?如果細(xì)菌在溶液中形成生物膜或聚集物,這將嚴(yán)重影響測(cè)量的準(zhǔn)確性和精度。在這種情況下,您可能需要對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行聲波降解或進(jìn)一步處理,以分解這些“簇”。查閱有關(guān)您正在使用的菌株的文獻(xiàn),以避免或消除這個(gè)問(wèn)題。?最重要的是,>1的OD值不準(zhǔn)確!這樣高的OD讀數(shù)超出了大多數(shù)分光光度計(jì)的動(dòng)態(tài)范圍,這意味著這些讀數(shù)不會(huì)隨著細(xì)胞濃度的增加而線(xiàn)性增加。如果你得到的OD值大于1,稀釋你的樣品2倍或更多直到它達(dá)到OD600<1。?如果你經(jīng)常用燒瓶培養(yǎng)細(xì)菌,訓(xùn)練自己用眼睛估計(jì)OD值是有幫助的。這樣,當(dāng)燒瓶明顯不在您正在尋找的OD范圍內(nèi)時(shí),跳過(guò)OD600檢查可以節(jié)省寶貴的時(shí)間。查看本文了解更多信息,并考慮使用微板閱讀器來(lái)提高OD測(cè)量的吞吐量。?其他監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)和代謝的方法?雖然使用一種培養(yǎng)物的OD600來(lái)監(jiān)測(cè)生長(zhǎng)是一種久經(jīng)考驗(yàn)的真實(shí)方法,但是還有其他幾種方法來(lái)評(píng)估細(xì)菌培養(yǎng)物的生長(zhǎng)和代謝。您可能會(huì)發(fā)現(xiàn)其中一些因素對(duì)于您的特定應(yīng)用程序也更相關(guān)或有用!?通過(guò)采集培養(yǎng)物的樣本并在顯微鏡下進(jìn)行檢查,你可以開(kāi)始對(duì)培養(yǎng)物中活細(xì)胞的近似濃度有一個(gè)了解。額外的好處:你可以比較細(xì)胞的圖片,看看是否有不同的形態(tài)學(xué)批次,或多少營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在一個(gè)孢子形成培養(yǎng)。?溶解氧和二氧化碳??紤]啤酒(由酵母制成),康普茶(由酵母和各種細(xì)菌制成),以及其他由微生物發(fā)酵的飲料。在這些例子中,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,氧氣(O2)被消耗,二氧化碳(CO2)被形成。同樣的過(guò)程發(fā)生在有氧培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)中!溶解O2和CO2探頭是生物反應(yīng)器中常用的探頭。如果你想要一個(gè)微創(chuàng)的選擇,光學(xué)傳感器(和補(bǔ)丁)存在,使用LED熒光監(jiān)控溶解-2從外面瓶啊!?大多數(shù)細(xì)菌隨著時(shí)間的推移會(huì)降低培養(yǎng)基的pH值,包括大腸桿菌。對(duì)于某些物種來(lái)說(shuō),酸的產(chǎn)生實(shí)際上會(huì)限制一個(gè)文化的最大生長(zhǎng)和生存能力。與氧傳感器一樣,有方法可以對(duì)燒瓶中的pH值進(jìn)行無(wú)創(chuàng)連續(xù)監(jiān)測(cè)。?糖的分析。有了某些儀器,從生長(zhǎng)培養(yǎng)基中快速可靠地測(cè)定殘余糖分是可能的。例如,如果你的培養(yǎng)基中主要的碳源是葡萄糖,在細(xì)菌生長(zhǎng)的中途獲取葡萄糖測(cè)量數(shù)據(jù)可以讓你了解培養(yǎng)基在生長(zhǎng)曲線(xiàn)中的位置。?那么你應(yīng)該在什么時(shí)候收獲一種文化呢??簡(jiǎn)而言之,這完全取決于文化的最終目標(biāo)是什么。例如,我曾經(jīng)大量培育和誘導(dǎo)大腸桿菌過(guò)度表達(dá)非本地蛋白,然后從培養(yǎng)中純化。我經(jīng)常發(fā)現(xiàn),我從培養(yǎng)物中獲得的蛋白質(zhì)的質(zhì)量和數(shù)量取決于我收獲時(shí)的相細(xì)胞。然而,在其他情況下,目標(biāo)只是盡可能多的獲取細(xì)胞。?一旦你知道了需要采集細(xì)胞的特定生長(zhǎng)階段,一定要進(jìn)行一些測(cè)試(包括測(cè)量),以確保你對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)間的評(píng)估是正確的。這將給你一個(gè)強(qiáng)烈的感覺(jué),你的文化需要多長(zhǎng)時(shí)間準(zhǔn)備收獲,并提供歷史數(shù)據(jù)比較增長(zhǎng)曲線(xiàn)。始終從一個(gè)較小的“種子”文化開(kāi)始,以獲得可靠的和持續(xù)增長(zhǎng)的燒瓶。最后,如果你不太適應(yīng)減少污染的風(fēng)險(xiǎn),可以測(cè)試你的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)幾次。

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